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无菌室建设规划是一个应用行业非常广泛的基础性配套产业，在电子信息、半导体、医药卫生、生物工程、航天航空等众多行业均有应用，并根据行业的精密与无尘要求，等级差别也较大。无菌室应根据既经济又科学的原则来设置。其基本要求有以几点:
一、无菌室要求
1、无菌室应有内外两间,内间是无菌室,外间是缓冲室。房间容积不宜过大,以便于空气灭菌。最小内间面积2x2.5= 5m2 ,外间面积1x2= 2m2 ,高以2.5m以下为宜,都应有天花板。
2、内间应当设拉门,以减少空气的波动,门应设在离工作台最远的位置上。外间最好也用拉门,要设在距内间最远的位置上。
3、在分隔内间与外间的墙壁或隔扇上开一个小窗,作接种过程中必要的内外传递物品的通道,以减少人员进出内间的次数,降低污染程度。小窗宽60cm、高40cm、 厚30cm，内外都挂对拉的窗扇。
4、无菌室容积小而严密,使用一段时间后,室内温度很高,故应设置通气窗。通气窗应设在内室进门处的顶棚上(即离工作台最远的位置),最好为双层结构,外层为百叶窗,内层可用抽板式窗扇。通气窗可在内室使用后、灭菌前开启,以流通空气。有条件可安装恒温恒湿机。
二、无菌室内设备和用具
1、无菌室内的工作台,不论是什么材质用途,都要求表面光滑和台面水平。
2、在内室和外室各安装一个紫外灯 (多为30W )。内室的紫外线灯应安装在经常工作的座位正上方离地面2m ,外室的紫外线灯可安装在外室中央。
3、外室应有专用的工作服、鞋、帽、口罩、盛有来苏儿水的瓷盐和毛巾、持喷雾器和5%石炭酸溶液等。
4、内室应有酒精灯、常用接种工具、不锈钢制的刀、剪、镊子、70%的酒精棉球、工业酒精、载玻璃片、特种蜡笔、记录本、铅笔、标签纸、胶水、废物筐等。
三、无菌室的灭菌消毒
1、蒸:这是无菌室彻底灭菌的措施。无菌室使用了较长时间,污染此较严重时,应进行薰蒸灭菌。可用甲醛、乳酸或硫磺薰蒸。
2、喷雾:在每次使用无菌室前进行。喷雾可促使空气中微粒及微生物沉降,防止桌面、地面上的微尘飞场,并有杀菌作用。可用5%石炭酸喷雾。
3、紫外线照射:在每次使用无菌室前进行。紫外线有较好的杀菌效果。通常应开启紫外线灯照射30 ~ 60min。
四、无菌室工作规程
1、无菌室灭菌。每次使用前开启紫外线灯照射30min以上,或在使用前30min ,对内外室用5%石炭酸喷雾。
2、用肥皂洗手后,把所需器材搬入外室。在外室换上已灭菌的工作服、工作帽和工作鞋,戴好口罩,然后用2%煤酚皂液将手浸洗2分钟。
3、将各种需用物品搬进内室清点就位,用5%石炭酸在工作台面上方和操作员站位空间喷雾,返回外室, 5~ 10min后再进内室工作。
4、接种操作前,用70%酒精棉球擦手。进行无菌操作时,动作要轻缓,尽量减少空气波动和地面扬尘。
5、工作中应注意安全。如遇棉塞着火用湿布包裹熄灭,切勿用嘴吹,以免扩大燃烧。如遇有菌培养物洒落或打碎有菌容器时,应用浸润5%石炭酸的抹布包裹后, 并用浸润5%石炭酸的抹布擦拭台面或地面,用酒精棉球擦手后再继续操作。
6、工作结束后立即将台面收拾干净,将不应在无菌室存放的物品和废弃物全部拿出无菌室后,对无菌室用5%石炭酸喷雾,或开紫外线灯照射30min。
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